Fluoresensiemikroskopie het 'n rewolusie in ons vermoë om biologiese monsters te visualiseer en te bestudeer, wat ons in staat gestel het om in die ingewikkelde wêreld van selle en molekules te delf. 'n Sleutelkomponent van fluoressensiemikroskopie is die ligbron wat gebruik word om fluoresserende molekules binne die monster op te wek. Deur die jare is verskeie ligbronne gebruik, elk met sy unieke eienskappe en voordele.
1. Kwiklamp
Die hoëdruk-kwiklamp, wat wissel van 50 tot 200 watt, is met behulp van kwartsglas gebou en is sferies van vorm. Dit bevat 'n sekere hoeveelheid kwik binne. Wanneer dit werk, vind 'n ontlading tussen twee elektrodes plaas, wat veroorsaak dat kwik verdamp, en die interne druk in die sfeer neem vinnig toe. Hierdie proses neem gewoonlik ongeveer 5 tot 15 minute.
Die emissie van die hoëdruk kwiklamp is die gevolg van die disintegrasie en vermindering van kwikmolekules tydens die elektrode-ontlading, wat lei tot die vrystelling van ligfotone.
Dit straal sterk ultraviolet en blou-violet lig uit, wat dit geskik maak vir opwindende verskeie fluoresserende materiale, en daarom word dit wyd in fluoressensiemikroskopie gebruik.
2. Xenonlampe
Nog 'n algemeen gebruikte wit ligbron in fluoressensiemikroskopie is die xenonlamp. Xenonlampe, soos kwiklampe, verskaf 'n breë spektrum van golflengtes van ultraviolet tot naby-infrarooi. Hulle verskil egter in hul opwekkingsspektra.
Kwiklampe konsentreer hul emissie in die naby-ultraviolet, blou en groen streke, wat die generering van helder fluoresserende seine verseker, maar kom met sterk fototoksisiteit. Gevolglik word HBO-lampe tipies gereserveer vir vaste monsters of swak fluoressensiebeelding. In teenstelling hiermee het xenonlampbronne 'n gladder opwekkingsprofiel, wat intensiteitsvergelykings by verskillende golflengtes moontlik maak. Hierdie eienskap is voordelig vir toepassings soos kalsiumioonkonsentrasiemetings. Xenonlampe vertoon ook sterk opwekking in die naby-infrarooi reeks, veral rondom 800-1000 nm.
XBO-lampe het die volgende voordele bo HBO-lampe:
① Meer eenvormige spektrale intensiteit
② Sterker spektrale intensiteit in die infrarooi en middel-infrarooi streke
③ Groter energie-uitset, wat dit makliker maak om die doelwit se diafragma te bereik.
3. LED's
In onlangse jare het 'n nuwe mededinger na vore gekom op die gebied van fluoressensiemikroskopie-ligbronne: LED's. LED's bied die voordeel van vinnige aan-af-skakeling in millisekondes, wat monsterblootstellingstye verminder en die lewensduur van delikate monsters verleng. Verder vertoon LED-lig vinnige en presiese verval, wat fototoksisiteit aansienlik verminder tydens langtermyn lewende sel-eksperimente.
In vergelyking met wit ligbronne, straal LED's gewoonlik binne 'n nouer opwekkingspektrum uit. Daar is egter verskeie LED-bande beskikbaar, wat veelsydige veelkleurige fluoressensietoepassings moontlik maak, wat LED's 'n toenemend gewilde keuse maak in moderne fluoressensiemikroskopie-opstellings.
4. Lasers Ligbron
Laserligbronne is hoogs monochromaties en rigtinggewend, wat hulle ideaal maak vir hoë-resolusie mikroskopie, insluitend super-resolusie tegnieke soos STED (Gestimuleerde Emissie Depletion) en PALM (Photoactivated Localization Microscopy). Laserlig word tipies gekies om te pas by die spesifieke opwekkingsgolflengte wat benodig word vir die teikenfluorofoor, wat hoë selektiwiteit en akkuraatheid in fluoressensie-opwekking bied.
Die keuse van 'n fluoressensie mikroskoop ligbron hang af van die spesifieke eksperimentele vereistes en monster eienskappe. Voel asseblief vry om ons te kontak indien jy enige hulp nodig het
Postyd: 13-Sep-2023